Transwell检测
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1、实验原理
细胞迁移是指细胞在接收到内源或外源迁移信号后而产生的移动。细胞迁移是通过胞体形变进行的缓慢的定向移动,涉及细胞觅食、伤口痊愈、胚胎发生、免疫反应、感染和癌症转移等生理现象。因此通过对细胞迁移的研究,对阻止癌症转移、异体植皮等医学应用方面具有一定意义。细胞侵袭实验则是研究肿瘤细胞对基质膜消化后的迁移运动,肿瘤细胞须经血管基底膜穿入深面间质后才能侵袭组织和转移至远处。
肿瘤细胞侵袭迁移能力的改变通常采用Transwell小室进行检测。Transwell小室是一种膜滤器,也认为是一种有通透性的支架(Permeable Supports)。这层膜带有微孔,孔径大小0.1-12.0μm,根据不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜。将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。我们将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可用影像到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。
2、技术应用
应用包括细胞迁移、趋化(趋化因子对细胞的定向诱导),侵袭(癌细胞侵袭上指肿瘤细胞向局部侵犯或远处转移),共培养(同一培养体系里,两种细胞非接触性培养)。
3、实验步骤
1.细胞培养;2.基质胶覆盖小室;3.细胞计数及接种小室;4.结晶紫染色;5封片和拍照;6. 结果分析
4、结果展示
客户提供:细胞株(冻存株或培养细胞)及处理用的药物,细胞培养基信息,细胞特殊处理方式
HYY提供:原始图片、原始数据,完整实验报告