电转操作视频

       自2019年9月9日HYY自主研发CellEasy^TM低电压基因电转仪上市以来，得到了广大老师同学的热烈反馈，纷纷打来电话咨询电转仪相关事项。讲座预约不断，今天HYY的科研小伙伴用心为大家带来了关于细胞电转的操作视频及细胞电转详细步骤。电转仪我们一起用起来吧！

一、操作步骤

检测前准备工作

试剂耗材：

细胞培养基DMEM或1640、FBS、0.25%胰蛋白酶 (自配，无菌)、PBS (自配，无菌)、电转缓冲液。

测试细胞：根据实验分组提前准备好电转需要用到的细胞，每个电转杯需要1×10⁶个细胞。

其他准备：用具准备电转仪器、电转杯（1mm）、电转液、毛细管枪头、6孔板、倒置荧光显微镜、移液器。

二、细胞实验流程

1、细胞消化，用PBS处理成细胞悬液，计数，离心（1000rpm，5min）弃PBS；

2、850ul电转液重悬107cells，每个电转杯加入的细胞悬液约85uL；

3、细胞悬液中加入质粒8.5ug(终浓度10ug/mL），混匀；

4、毛细管枪头移取85ul到电转杯，从底部加入，保证没有气泡，气泡会影响电转效果；

5、调好仪器参数，逐个电转，电转结束后迅速加入少量培养基；

6、六孔板中提前加入2ml完全培养基，电转细胞悬液吸出加入到孔板，37℃培养箱静置培养24-48h，观察荧光蛋白表达，计算电转效率；电转后第2天观察细胞存活率；

7、依次操作完上述所有样品；

8、收拾台面，电转杯及时清洗，仪器归位。

三、说明书